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核酸提取的基本步驟純化原則和要求及其工作原理

更新時間:2022-04-19點(diǎn)擊次數(shù):1936
  核酸提取儀也叫核酸純化儀是應(yīng)用配套的試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。最近幾年才得到應(yīng)用推廣的儀器。核酸是核苷酸單體聚合而成的生物大分子,是生物細(xì)胞最基本和最重要的成分。一般認(rèn)為,生物進(jìn)化即始于核酸,因為在所有生命物質(zhì)中只有核酸能夠自我復(fù)制。核酸是生物遺傳信息的貯藏場所和傳遞者。核酸分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)兩大類。這兩類核酸有某些共同的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),但生物功能不同。
  核酸提取的基本步驟
  1、裂解細(xì)胞,釋放核酸。使用裂解液破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中;
  2、核酸的分離與純化。需要將與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)以及多糖、脂類等生物大分子和其他不需要的核酸分子去除;
  3、核酸的濃縮、沉淀;
  4、純化核酸。純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)*分離的過程。
  核酸提取純化原則和要求
  1、需要保證核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性,為下游實(shí)驗做準(zhǔn)備;
  2、排除其它核酸分子的污染(提取DNA時排除RNA的干擾,反之亦然);
  3、核酸樣品中沒有對酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和高濃度的金屬離子;
  4、將核酸樣品中其它生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子的污染降到低程度。
  
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